Interferencia de la lipoproteina (a) en la cuantificación del colesterol de las HDL mediante ultracentrifugación.

Abstract

Se ha determinado la influencia de la presencia de la Lp (a) en el plasma sobre el valor de colesterol HDL. El plasma de 604 sujetos, seleccionados sin atender a ningún criterio restrictivo de edad, sexo o enfermedad, se procesó para la determinación de la concentración de colesterol y triglicéridos en HDL, que fueron separados tanto por precipitación con fosfotungstato-MgCl 2 como por ultracentrifugación diferencial secuencial en el límite de densidad 1,063-1,21 kg/1. La presencia de Lp (a) se determinó atendiendo a la aparición, en electroforesis en gel de agarosa, de una banda con movilidad pre-p ("pre-~-oculta") en el infranadante del plasma de densidad superior a 1,006 kg/1 (libre de VLDL) y las muestras se clasificaron en pre-P,oculta ( +) y pre-p-oculta (-), respectivamente. La Lp (a) también se cuantificó en el plasma mediante enzimoinmunoanálisis y se observó una estrecha corresoondencia entre la aparición de pre-P-oculta y ~na concentración plasmática de Lp (a) superior a 300 mg/1. En las muestras pre-P-oculta ( +), pero no en las pre-P-oculta (-), el valor de cHDL obtenido por ultracentrifugación fue significativamente superior al obtenido por precipitación y existía una correlación lineal y positiva entre la diferencia de ambos y la concentración de Lp (aj en el plasma. Una concentración de Lp (a) de 300 mg/1 (que presenta más del 27 % de la población estudiada) determina un valor de cHDL por ultracentrifugación superior al de precipitación en 0,129 mmol/1, aproximadamente. La diferencia entre ambos valores se atribuye a que la Lp (a) precipita junto con las LDL bajo la acción de los polianiones mientras que, por ultracentrifugación, se separa parcialmente junto con las HDL.

We stúdied the influence of the presence of Lp (a) on the measurement of plasma HDLc. The plasma of 604 unselected subjects was processed to measure the concentrations of cholesterol and triglycerides in the HDL fraction, separated both by phosphotungstate-MgCl2 precipitation and by sequential ultracentrifugation at the 1.063-1.21 kg/1 density range. Lp (a) was detected as a band of pre-B mobility ("occult pre-B") by sepharose gel electrophoresis of d > 1.006 kg/1 infranatant plasma (VLDL free), and the samples were classified as positive or negative. Lp (a) was also quantified in plasma by enzymatic immunoassay, and a close correspondence was found between the appearance of an "occult pre-B" band and a plasma concentration of Lp (a) higher than 300 mg/1. In samples positive for occult pre-B, but not in the negative ones, the value of HDLc obtained by ultracentrifugation was significantly higher than that obtained by precipitation. In addition, a positive lineal correlation existed between the difference in the two HLD measurements and plasma Lp (a) concentration. An Lp (a) concentration of 300 mg/dl was present in more than 27 o/o of the study population and determined a HDLc value by ultracentrifugation an average of 0.129 mmol/1 higher than that obtained by precipitation. The difference between the two values is due to the fact that Lp (a) precipitates along with LDL under the effect of polyanions, while it partially separates with HDL during ultracentrifugation.